論文摘要
金納米棒(AuNRs)和PPTT的引入可以影響細(xì)胞骨架和細(xì)胞的連接,從而抑制癌細(xì)胞的集體遷移;該研究中使用STORM超分辨顯微鏡進(jìn)一步觀察了被擾亂了肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架,同時(shí)另一臺(tái)顯微鏡被用來(lái)記錄實(shí)驗(yàn)中的DIC圖像(放大率高達(dá)200x),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,整合素靶向的AuNRs和細(xì)胞間的相互作用可以觸發(fā)磷酸化變化,并引起它們的形態(tài)或表達(dá)水平改變,這是細(xì)胞骨架絲和細(xì)胞連接的關(guān)鍵成分,也使得腫瘤集體的遷移得到抑制。
蛋白的STORM成像.png)
胞吞噬.png)
圖1?肌動(dòng)蛋白的STORM成像(A)和常規(guī)熒光顯微鏡成像(B)的比較
圖2 ?AuNRs?處理后的細(xì)胞吞噬、細(xì)胞毒性和運(yùn)動(dòng)能力。(A-B) HeLa細(xì)胞在沒(méi)有AuNRs@RGD (A)和有AuNRs@RGD(B)培養(yǎng)24小時(shí)后的DIC顯微圖像。(C)?培養(yǎng)24 h后AuNRs@RGD在細(xì)胞連接區(qū)分布的DIC圖像
成像技術(shù)分析
傳統(tǒng)的熒光顯微鏡難以突破光學(xué)衍射的極限,無(wú)法觀察到金納米棒和PPTT的引入對(duì)細(xì)胞的影響情況,如果沒(méi)有超分辨率顯微鏡,就無(wú)法對(duì)其進(jìn)行成像。Dhyana 95和Dhyana?400BSI相機(jī)是2款緊湊、強(qiáng)大、靈活的sCMOS相機(jī),非常適合超分辨應(yīng)用,相機(jī)擁有多種不同增益模式,包括CMS低噪聲讀出模式和高動(dòng)態(tài)模式,背照式sCMOS不僅實(shí)現(xiàn)了接近完美的95%量子效率,而且還有諸如2"大感光面積,200-1100nm寬光譜響應(yīng),和有益于提高靈敏度及動(dòng)態(tài)范圍的6.5~11um大像素尺寸等其他sCMOS相機(jī)所不具備的諸多優(yōu)勢(shì)。因此可以在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)以較低的照明強(qiáng)度和較短的曝光時(shí)間進(jìn)行成像,而不會(huì)造成樣本的光損傷和光漂白。
參考源
Wu Y, Ali MRK, Dong B, Han T, Chen K, Chen J, Tang Y, Fang N, Wang F, El-Sayed MA. Gold Nanorod Photothermal Therapy Alters Cell Junctions and Actin Network in Inhibiting Cancer Cell Collective Migration. ACS Nano. 2018 Sep 25;12(9):9279-9290. doi: 10.1021/acsnano.8b04128. Epub 2018 Aug 27. PMID: 30118603; PMCID: PMC6156989